Fish Gelatin Fast Blocking Kit 【Powder】
用于WB实验的转印膜对蛋白质具有高亲和力，可以结合和保留需要被转移的目标蛋白质。抗体本质也为蛋白质，在检测目标蛋白前，必须使用封闭剂对膜上未被目标蛋白结合的空白区域进行结合、封闭，防止抗体与膜的非特异性导致过高的背景。
合适的封闭条件可以在增强“抗原-抗体”相互作用的同时显著降低背景，不充分的封闭会导致过高的背景，而过度的封闭则会导致抗体对抗原的特异性识别受到封闭剂的影响，降低结果的可信度。
尽管封闭是免疫实验的关键步骤之一，但实验者往往容易忽视对封闭剂的认真选择。
脱脂奶粉含有牛奶中的多种蛋白质，如乳清蛋白和酪蛋白，是最常见的封闭剂之一。脱脂奶粉价格低廉、易制备，但需要在使用前应进行过滤以防止微粒与膜结合造成“斑点”背景。
由于牛奶中含有磷酸化的酪蛋白，可被抗磷酸化酪氨酸的抗体识别，导致抗体的非特异性结合进而形成高背景结果，因此在检测磷酸化蛋白时，不建议使用脱脂奶粉。此外使用含有生物素（Biotin）的检测体系时，也不能使用牛奶，因为牛奶也中存在Biotin。
常规实验操作是用5% NFDM进行封闭，但当待测蛋白的丰度较低时，高浓度的牛奶会封闭某些抗原表位，让本就微弱的结果消失殆尽。因此，我们建议此时从较低浓度的脱脂奶粉封闭液开始进行封闭条件摸索（如1% m/v）。
BSA来源于奶牛血清，与牛奶类似，是一种很好的通用封闭剂且易于在实验室中制备。与含牛奶的缓冲液类似，BSA溶液在使用前应进行过滤以去除颗粒，防止“斑点”背景产生。
在检测磷酸化蛋白时，BSA 通常优于牛奶，且用其稀释配制的抗体工作液不易变性，可以重复使用。BSA 的工作浓度通常为 0.3-5%，其中以3%的浓度最为常见。
血清（Serum）
血清通常来源于马或胎牛，价格比牛奶和BSA更高，不常用作封闭剂。全血清含有多种蛋白质，免疫组化实验中作为封闭剂使用的血清浓度一般为10% m/v。
全血清含有免疫球蛋白，可能与一抗或二抗发生交叉反应导致非特异性背景。但在与样本物种差异比较大的情况下，血清作为封闭剂的效果仍然较为优秀。
鱼胶（Fish Gelatin）
鱼胶蛋白更常用于免疫组织化学，在WB实验中，2%鱼胶蛋白可用作封闭剂。鱼胶相比BSA和牛奶，不会与哺乳动物蛋白质发生交叉反应。由于鱼胶含有内源性生物素，它不能与Biotin检测系统一起使用。
Fish Gelatin Fast Blocking Kit【Powder】为粉末状颗粒，每袋可配制100 ml封闭工作液，2分钟速溶，无需过滤、操作简便，其主要成分为高纯度的鱼胶蛋白，配制成1×工作液后的蛋白浓度为5% m/v，适用于WB,IHC-P,IHC-F,ICC/IF,ELISA实验的抗体封闭步骤。
鱼胶蛋白为小分子多肽，相比于大分子蛋白，与转印膜结合效果效果好、封闭效率更高，可有效降低因封闭不足导致的高背景；
提高信噪比，增强抗体信号，为抗原-抗体结合提供了绝佳的反应环境，能节约抗体使用；
预混TBST，加入蒸馏水2分钟速溶，可在15分钟左右快速完成封闭操作并能保证与常规封闭剂相同的效果，大幅缩短封闭时间。
● 封闭效果对比测试
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测试抗体：
#250060 NF-KB p65 (3D2) Mouse mAb；
#200306-7E4 GAPDH (7E4) Mouse mAb；
左侧：NFDM封闭60分钟
右侧：快速封闭剂15分钟
均在室温条件下检测。
Fish Gelatin Fast Blocking Kit 【Powder】
货号：#18004
应用：WB,IHC-F,IHC-P,ICC/IF,ELISA
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